Получены ризогенная, каллусная и суспензионная культуры in vitro наперстянки шерстистой Digitalis lanata и исследованы их ростовые, цитофизиологические и биохимические особенности. Полученные культуры характеризовались удовлетворительными ростовыми характеристиками (индексы роста I в пределах 5–13). Суспензионная культура клеток имела удельную скорость роста μ в пределах 0.2–0.3 сут–1 и для нее была характерна двухфазная ростовая кривая (задержка роста во время экспоненциальной фазы). В полученных культурах методами UPLC-ESI-MS и HPLC-ESI-MS проведено исследование качественного и количественного состава вторичных метаболитов, которое показало отсутствие в них сердечных гликозидов. В то же время во всех исследованных культурах были обнаружены гликозиды фенилэтаноидов и стероидные гликозиды фуростанолового ряда. Общее содержание фенилэтаноидов в каллусной и суспензионной культурах составляло около 0.5% к сухой биомассе клеток. На основании результатов масс-спектрометрии идентифицировано 10 структур фенилэтаноидов, в том числе дигицилизид А, дигицилизид В, максозид, пурпуреазид E и их метильные производные и изомеры, а также 7 фуростаноловых гликозидов с агликонами тигогенин и гитогенин. Показано, что состав вторичных метаболитов зависит от степени дифференцировки клеток: в ризогенной культуре, состоящей преимущественно из дифференцированных клеток, преобладают фуростаноловые гликозиды, тогда как в каллусной и суспензионной культурах клеток, состоящих из дедифференцированых клеток, существенно расширяется разнообразие фенилэтаноидов. Полученные результаты подтверждают выдвинутую в наших предыдущих работах гипотезу о специфичности вторичного метаболизма и его высокой интенсивности в культурах клеток высших растений.